精品一区二区久久久久久诱惑-哺乳一区二区久久久免费-一区二区三区四区高清黄片-国产老熟女乱一区二区三区

您的位置: 首頁(yè) > 技術(shù)文章 > 原代細(xì)胞傳代方法有哪幾種?

原代細(xì)胞傳代方法有哪幾種?

更新時(shí)間:2021-04-07瀏覽:1632次

原代細(xì)胞是指從機(jī)體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行模擬機(jī)體培養(yǎng)的 
細(xì)胞,稱為原代細(xì)胞。
一股認(rèn)為,培養(yǎng)的原代的第1代細(xì)胞和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)抱培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細(xì)胞生存、生長(zhǎng)、繁殖和傳代,進(jìn)行細(xì)胞生命過(guò)程、細(xì)胞瘍變、細(xì)胞工程等問(wèn)題的研究。
那么關(guān)于原代細(xì)胞的傳代培養(yǎng),我們應(yīng)該怎么做呢?一股有以下兩種方法:
一、貼壁細(xì)胞的消化法傳代
1、吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液。
2、加入1ml左右消化液(胰蛋白鱷或與EDTA混合液)輕輕接動(dòng)培養(yǎng)瓶,使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中.
3、消化2-5分鐘后把培養(yǎng)瓶放置在顯微鏡下進(jìn)行觀察,發(fā)現(xiàn)原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時(shí),棄去消化液,加入培養(yǎng)液終止消 
化。
4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液,分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中,置37℃培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng).第二天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
二、懸浮細(xì)胞的傳代
1、直接傳代
①讓懸浮細(xì)胞慢慢沉淀在瓶底后,將上清吸掉1/2-2/3。
②用吸管吹打形成細(xì)胞懸液后,分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中,置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
2、離心法傳代
①將細(xì)胞連同培養(yǎng)液一并轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),離心800-1 OOOrpm, 5分鐘。
②去除上清,加新的培養(yǎng)液到離心管內(nèi),用吸管吹打使之形成細(xì)胞懸液。
③將細(xì)胞懸液分別接種到另外兩到三個(gè)培養(yǎng)瓶中,置37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

 

聯(lián)系我們
  • QQ:1242926414
  • 郵箱:1242926414@qq.com
  • 傳真:86-027-87800889
  • 地址:武漢東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號(hào)武漢光谷國(guó)際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器1.2期C22棟二層

掃一掃,關(guān)注公眾號(hào)

©2025 武漢尚恩生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有    備案號(hào):鄂ICP備2020018368號(hào)-2    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    Sitemap.xml    總訪問(wèn)量:170944    管理登陸